تهیه سازه حاوی توالیهای omega و sar جهت افزایش بیان ژن گزارشگر gus در بذر
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زنجان - دانشکده کشاورزی
- نویسنده مهسا مکانیک
- استاد راهنما بهرام ملکی زنجانی مسعود توحیدفر
- سال انتشار 1390
چکیده
از مهمترین فاکتورهای محدود کننده تولید پروتئنیهای نوترکیب در گیاهان، پائین بودن سطح بیان ژنهای وارد شده است. انتخاب بافت مناسب گیاه جهت بیان و نیز بهبود تظاهر قطعه ژنی از جمله راههای افزایش بیان ژن منتقل شده به گیاه می باشد. در این پژوهش با طراحی و تهیه سازه اختصاصی بذر به همراه قطعات افزاینده بیان ژن (omeg و sar) سعی شده است تا ضمن بیان اختصاصی ژن مدنظر در بذر گیاه، افزایش بیان قطعه ژنی را نیز شاهد باشیم. توالی omega مورد استفاده به عنوان یک تنظیم کننده ترجمه عمل می کند و کارایی ترجمه را بالا می برد و توالی sar با مکانیزم های مختلف می تواند از خاموشی ژن منتقل شده ممانعت بعمل آورد. در این تحقیق از قطعه ای به نام ps206-1 به عنوان sar استفاده گردید. در ابتدا با طراحی آغازگرهای اختصاصی وانجام واکنش pcr قطعه omega به ابتدای ژن gus متصل شد. قطعه ی sar (ps206-1) نیز از ژنوم گیاه توتون جداسازی گردید. سپس دو قطعه با استفاده از روش soeing pcr به هم متصل شدند به نحوی که توالی omega در بالادست ژن gus و توالی sar در پائین دست آن قرار گرفت. قطعه ی ترکیبی حاصله با سایز مورد انتظار، در ناقل ta همسانه سازی شد و صحت انجام کار با استفاده از روش های کلنی pcr، هضم آنزیمی و توالی یابی مورد تایید قرار گرفت. در مرحله بعد ساب کلونینگ در وکتور گیاهی pbi121 که در آن پیشبر camv35s با پیشبر اختصاصی بذر جایگزین شده بود، انجام شد.
منابع مشابه
تهیه سازه اختصاصی بذر حاوی قطعات omega و sar به منظور افزایش بیان ژن در بذر گیاه
پایینبودن سطح بیان ژنها، از مهمترین فاکتورهای محدودکننده تولید پروتئینهای نوترکیب در گیاهان میباشد. انتخاب بافت مناسب گیاه جهت بیان و نیز بهبود تظاهر قطعه ژنی از جمله راههای افزایش بیان ژن در گیاه میباشند. در این پژوهش با طراحی و تهیه سازه اختصاصــــی بذر بههــــمراه قطعـــات افزایـــنده بیــان ژن؛ omega(tobacco mosaic virus 5' –leader) و sar (scaffold attachment region) سعی شده است تا ...
متن کاملطراحی وساخت سازه ژنی حاوی توالی هایkdel، signal sequence ، 3arc , 5utr جهت افزایش بیان گزارشگر gus بذری
تولید پروتئینهای نوترکیب در بذر گیاهان به دلایل متعددی از جمله هزینه پائین تولید، پایداری بیشتر پروتئین، تخلیص راحت تر، ایمنی بیشتر به عنوان یک جایگزین مناسب مورد توجه قرار گرفته است. یکی از مهمترین فاکتورها جهت مقرون به صرفه شدن این تکنولوژی، بالا بردن بیان پروتئین نوترکیب است. ازراهکارهای افزایش تظاهر و تجمع پروتئین نوترکیب ، طراحی و تهیه سازه مناسب است به نحوی که همزمان با بیان پروتئین در با...
15 صفحه اولتراریزش ژن گزارشگر gus به پنبه و مطالعه وراثت و بیان آن در نسل دوم پنبه تراریخته
تولید گیاهچه تراریخته پنبه (Gossypium hirsutum L.) با واسطه اگروباکتریوم سویه LBA4404 و پلاسمید pBI121 حاوی ژن گزارشگر gus و ژن نشانگر انتخابی nptII به ترتیب با پیشبرهای CaMV35S و NOS بررسی شد. پنبههایی که بوسیله ژن gus تراریخته شده بودند و بیان ژن مذکور در بافتهای مختلف (الیاف و دانه گرده) به اثبات رسیده بود از نظر وراثت ژن مذکور در نسل دوم (T1) با استفاده از روشهای محیط کشت انتخاب، PCR و ر...
متن کاملبهینهسازی انتقال ژن به ارقام گلابی (Pyrus communis L.) با استفاده از ژن گزارشگر gus
Nowadays, genetic engineering methods are able to reduce the time of breeding programs for improvement of fruit trees, as well as offering a focused breeding system. The purpose of the present investigation was to study the factors that affect Agrobacterium tumefacience mediated transformation of two pear cultivars: Bartlett and Harrow Delight. Two explants (leaves and axillary shoot meristems)...
متن کاملبیان آنزیم فعال بتا-گلوکورونیداز در بذر گیاه توتون
هدف: طراحی و تهیه سازه ژنی مناسب و انتقال آن به گیاه توتون و بررسی گیاهان تراریخت حاصله بوده است.مواد و روش‌ها: سازه اختصاصی بذر حاوی پیشبرنده Napin، توالی Ω ، ژن GUS و توالی SAR در پلاسمید pBI121 طراحی و تهیه و در باکتری E. coli تکثیر شد. ریزنمونه‌های برگی توتون با آگروباکتریوم سویه LBA4404 بهروش استاندارد تلقیح شدند. گزینش جوانه‌های باززایی شده در محیط...
متن کاملتراریزش ژن گزارشگر gus به پنبه و مطالعه وراثت و بیان آن در نسل دوم پنبه تراریخته
تولید گیاهچه تراریخته پنبه (gossypium hirsutum l.) با واسطه اگروباکتریوم سویه lba4404 و پلاسمید pbi121 حاوی ژن گزارشگر gus و ژن نشانگر انتخابی nptii به ترتیب با پیشبرهای camv35s و nos بررسی شد. پنبههایی که بوسیله ژن gus تراریخته شده بودند و بیان ژن مذکور در بافتهای مختلف (الیاف و دانه گرده) به اثبات رسیده بود از نظر وراثت ژن مذکور در نسل دوم (t1) با استفاده از روشهای محیط کشت انتخاب، pcr و ر...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زنجان - دانشکده کشاورزی
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023